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四、简答题 (共2题,20.0分); M4 Z$ H u+ Z/ L [* b' o
1、
; G% g4 z* d! e7 a/ w! j$ n基因工程中,把外源基因(目的基因)分离出来的方法主要有哪些?$ a2 l0 m! Z% B2 V6 @
1 直接从基因文库中获取(鸟枪法-用限制酶处理DNA,再根据所需选择目的基因)
- D( P1 V' t' @. B6 l; E/ O3 I2 间接获取方法(人工合成)包括:反转录法和化学合成法
' z9 V7 s/ @) t# A 2、
2 V2 @9 Q$ t, h6 F+ ^- \" z. v% ~5 U简述单克隆抗体产生的技术原理。
# [2 E+ [2 ^, ]8 z2 ~4 y单克隆抗体技术原理如下:7 o }9 J4 _* m C
由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针对一种抗原表位的特异性抗体即单克隆抗体。
; v9 m! V/ T- T( r4 Y% h5 |- ^2 t单克隆抗体技术可用于探讨①蛋白质的精细结构;②淋巴细胞亚群的表面新抗原;③组织相容性抗原;④激素和药物的放射免疫(或酶免疫)分析;⑤肿瘤的定位和分类;⑥纯化微生物和寄生虫抗原;⑦免疫治疗和与药物结合的免疫-化学疗法 (“导弹”疗法,利用单克隆抗体与靶细胞特异性结合,将药物带至病灶部位。因此,单克隆抗体可直接用于人类疾病的诊断、预防、治疗以及免疫机制的研究,为人类恶性肿瘤的免疫诊断与免疫治疗开辟了广阔前景。
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