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' O( p0 [+ Z1 ?- B四、简答题 (共2题,20.0分)* H( [6 k1 W, {
1、
0 d+ R! H' h1 M0 \3 ^9 I基因工程中,把外源基因(目的基因)分离出来的方法主要有哪些?
: X+ r: Q+ e: }) g; P4 S1 直接从基因文库中获取(鸟枪法-用限制酶处理DNA,再根据所需选择目的基因)
4 E: q9 E) R" X. _, F# ^8 M2 间接获取方法(人工合成)包括:反转录法和化学合成法7 W0 W; [3 W8 ]7 N0 N9 V$ ]2 R
2、
; a/ F; A1 T) D% y2 m8 M% f: X简述单克隆抗体产生的技术原理。
6 ?, L8 C R$ z5 p, V/ Z5 `1 T单克隆抗体技术原理如下:# }/ e0 y- `7 H4 p* q
由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针对一种抗原表位的特异性抗体即单克隆抗体。
7 \% I/ n2 o# C5 O5 e4 ?单克隆抗体技术可用于探讨①蛋白质的精细结构;②淋巴细胞亚群的表面新抗原;③组织相容性抗原;④激素和药物的放射免疫(或酶免疫)分析;⑤肿瘤的定位和分类;⑥纯化微生物和寄生虫抗原;⑦免疫治疗和与药物结合的免疫-化学疗法 (“导弹”疗法,利用单克隆抗体与靶细胞特异性结合,将药物带至病灶部位。因此,单克隆抗体可直接用于人类疾病的诊断、预防、治疗以及免疫机制的研究,为人类恶性肿瘤的免疫诊断与免疫治疗开辟了广阔前景。
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