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: y( z3 H6 g& p, V- X" Y$ _0 @! c四、简答题 (共2题,20.0分)
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基因工程中,把外源基因(目的基因)分离出来的方法主要有哪些?& l0 S; L8 I8 H( {. A
1 直接从基因文库中获取(鸟枪法-用限制酶处理DNA,再根据所需选择目的基因)$ b' G5 s* F/ P% f( [/ z" n8 {
2 间接获取方法(人工合成)包括:反转录法和化学合成法
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7 i: R, U2 x1 V! ?. d0 ]简述单克隆抗体产生的技术原理。: M/ w/ Q$ Z4 G m3 P
单克隆抗体技术原理如下:
0 ^6 t# d6 R& z2 [7 c3 N2 o8 i. }由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针对一种抗原表位的特异性抗体即单克隆抗体。
# |! G# p$ i' s: |' I单克隆抗体技术可用于探讨①蛋白质的精细结构;②淋巴细胞亚群的表面新抗原;③组织相容性抗原;④激素和药物的放射免疫(或酶免疫)分析;⑤肿瘤的定位和分类;⑥纯化微生物和寄生虫抗原;⑦免疫治疗和与药物结合的免疫-化学疗法 (“导弹”疗法,利用单克隆抗体与靶细胞特异性结合,将药物带至病灶部位。因此,单克隆抗体可直接用于人类疾病的诊断、预防、治疗以及免疫机制的研究,为人类恶性肿瘤的免疫诊断与免疫治疗开辟了广阔前景。8 g/ Z, F+ Q$ i3 E% P4 g
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